c-Kit 基因位于人類染色體 4q12-13 區(qū)域，屬于原癌基因，編碼Ⅲ型酪氨酸激酶受體 CD117，其配體為干細胞因子（SCF）。該基因通過激活 PI3K、MAPK、JAK-STAT 等信 號通路，調(diào)控細胞增殖、分化、存活及凋亡，在造血干細胞、黑色素細胞、生殖細胞等發(fā) 育中起關(guān)鍵作用，并參與胚胎發(fā)育、配子形成及免疫細胞功能。

      c-Kit 異常激活與多種腫瘤相關(guān)，如 80%的胃腸道間質(zhì)瘤（GIST）存在 c-Kit 突變，常 見于 11 號外顯子（如 K642E 突變），導(dǎo)致受體持續(xù)活化，促進腫瘤生長；此外，急性髓 系白血病、黑色素瘤、肥大細胞增生癥等也可見其突變。靶向藥物如伊馬替尼可抑制異常 c-Kit 活性，改善患者預(yù)后，尤其在 GIST 中療效顯著。

      在正常生理中，c-Kit 還參與維持組織干細胞功能及生育能力。其功能缺失突變則可能 引發(fā)斑駁癥等遺傳性疾病。當(dāng)前，c-Kit 仍是癌癥靶向治療的重要靶點，相關(guān)藥物研發(fā)持續(xù) 推進，以優(yōu)化療效并克服耐藥性。

      c-Kit[V559_560 Del] BaF3 藥 靶 細 胞 ， 通過轉(zhuǎn)導(dǎo)缺失狀態(tài)的 c- Kit[V559_560 Del] 基因到 BaF3 細胞系中，穩(wěn)定表達人缺失形態(tài)下的 c-Kit[V559_560 Del] 基因。

      BaF3（小鼠原 B 細胞）的生長和增殖需要 IL-3 的維持。通過引入各種表達激酶的基因， 能作為 BaF3 的驅(qū)動基因，讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖，進而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴的驅(qū)動基因，用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用，原理及流程見下圖所示。
 

Figure 1. c-Kit[V559_560 Del] BaF3 細胞的構(gòu)建原理圖

1.WB of c-Kit [V559_560 Del] BaF3

Figure 2. WB of c-Kit [V559_560 Del] BaF3
 

2.Sanger of c-Kit [V559_560 Del] BaF3


Figure 3. Sanger of c-Kit [V559_560 Del] BaF3
 

3. Anti-proliferation assay

Figure 4. CTG Proliferation Assay of c-Kit [V559_560 Del] BaF3(C2).